测定原理：
在ATP和Mg2+存在下，GCL催化谷氨酸和半胱氨酸合成γ-谷氨酰半胱氨酸；同时ATP分解产生无机磷，通过测定无机磷增加速率，即可计算出GCL活性。

自备半岛游戏平台官网入口网址 用品：
低温离心机、可见分光光度计、水浴锅、1mL玻璃比色皿、浓硫酸、蒸馏水

试剂组成和配制：
试剂一：液体×1 瓶，4°C保存；
试剂二：粉剂×1 瓶，4°C保存，临用前加14mL蒸馏水充分震荡溶解；
试剂三：粉剂×1 瓶，4°C保存，临用前加3.5mL蒸馏水充分震荡溶解；
试剂四：液体×1 瓶，室温保存；
试剂五：粉剂×1 瓶，4°C保存，临用前加30mL蒸馏水充分震荡溶解，缓缓加入1.0mL浓硫酸，边加边搅拌。

样品前处理：
样本粗酶液提取详见说明书。测定组织和细胞同时需要测定蛋白浓度。

GCL测定步骤
1. 分光光度计预热30min 以上，调节波长到660nm，用蒸馏水调零；
2. 空白管：
（1）依次加入双蒸水120μL、试剂一240μL、试剂二260μL和试剂三60μL，混匀后盖紧，37°C水浴准确反应15分钟；
（2）加入试剂四300μL，混匀后，室温（25°C左右）下10000rpm离心10分钟，取上清500μL待测；
（3）加入试剂五500μL，混匀后盖紧，45°C水浴10分钟，冷却后测定660nm处吸光率，对大量样品，空白管只需做1-2个。
3. 测定管：
（1）依次加入试剂一240μL、试剂二260μL、试剂三60μL和前处理样品上清120μL，混匀后盖紧，37°C水浴准确反应15分钟；
（2）加入试剂四300μL，混匀后，室温（25°C左右）下10000rpm离心10分钟，取上清500μL待测；
（3）加入试剂五500μL，混匀后盖紧，45°C水浴10分钟，冷却后测定660nm处吸光率，计算△A=A测定管-A空白管。
注：吸光率需在水浴完成后尽快测定完成。