95%的乙醇脱氢酶(ADH)存在于肝小叶中心区,在肝细胞浆中占80%-90%,小部分存在于微粒中。因此血清中乙醇脱氢酶增高可研究肝细胞损伤。肝功组合中加入乙醇脱氢酶有如下几方面测定意义:
a、研究肝坏死,在急性肝炎,中毒性肝炎和缺氧导致肝细胞损伤,乙醇脱氢酶显著增高,为正常上限的5倍。
b、对慢性活动期和非活动期肝炎的研究,慢性期肝炎乙醇脱氢酶呈中度增高。
c、研究单纯ALT增高是不一定位于肝脏,如乙醇脱氢酶正常可以排除肝细胞的损伤,相反乙醇脱氢酶增加,即便没有其他疾病也会导致肝脏受损。
d、可研究梗阻性黄疸,脂肪肝,代偿性肝硬化,这些疾病血清的乙醇脱酶均正常。
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优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测50例左右样本。
2、取样量微:本法取样本量仅为50l
3、稳定性好:试剂盒2~8℃存放3个月有效。
4、再现性好:变异系数CV=1.3%。
5、回收试验: X =98%。
6、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
7、测试面广:可测动物血清(浆)、组织,效果均佳。
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及自备试剂:
1、紫外分光光度计(比色测定波长为340nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
操作流程:
1、按说明书操作将R1、R2、R3混合液育温10分钟
2、加入样本,340nm波长,0.5cm光径,测得OD值为A1
3、37℃水浴20分钟,340nm波长,0.5cm光径,测得OD值为A2