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线粒体呼吸链复合物IV检测试剂盒(正铁细胞色素C氧化还原酶)(比色法)
线粒体呼吸链复合物IV检测试剂盒(正铁细胞色素C氧化还原酶)(比色法)图片
货号: A089-4-1
参考价格: 2790元/盒
包装: 20管/10样
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货号: A089-4-1
参考价格: 2790
半岛bd体育手机客户端 别名: Electron transport chain Complex IV assay kit
线粒体呼吸链复合物IV试剂盒(正铁细胞色素C氧化还原酶)
半岛bd体育手机客户端 介绍

检测原理:
线粒体呼吸链复合物IV (Mitochondria Complex IV),又称为细胞色素C氧化还原酶(cytochrome c oxidoreductase)或细胞色素C氧化酶(Cytochrome c oxidase),存在于真核生物的细胞线粒体上,主要通过氧化磷酸化为细胞提供能量。呼吸链复合物IV是由13种不同的亚体构成的复合物,其中含有2个血红素(heme)基团(a和a3)和2
个铜原子,作为辅基(prosthetic groups)。呼吸链复合物IV的遗传变异导致氧化磷酸化类疾病,包括阿茨罕默综合症和肿瘤等。基于底物还原型细胞色素C(reducedcytochrome c),受到呼吸链复合物IV的催化,转化为氧化型细胞色素C(oxidizedcytochrome c),在分光光度仪下,出现吸光值的变化(550nm 波长),由此定量测定呼吸链复合物IV的活性。

试剂组成:(20 管/10 样))
缓冲液(Reagent A) 20 毫升
反应液(Reagent B) 2 毫升
稀释液(Reagent C) 1 毫升
稳定液 A(Reagent D1) 1 管
稳定液 B(Reagent D2) 250 微升
半岛bd体育手机客户端 说明书 1 份

保存方式
缓冲液(Reagent A)和稀释液(Reagent C)保存在4°C冰箱里,其余的保存在-20°C冰箱里;反应液(Reagent B)避免光照;有效保证6月

用户自备
比色皿:用于比色分析的容器
双波长分光光度仪:用于比色分析
培养箱:用于孵育反应物
1.5 毫升离心管:用于反应液配制的容器

实验步骤
(一)、背景对照测定
1、移取 800 微升缓冲液(Reagent A)到新的比色皿
2、加入 100 微升稀释液(Reagent C)
3、上下倾倒数次,混匀
4、室温静置 3 分钟
5、加入 100 微升含有反应液(Reagent B)和稳定液(Reagent D)的工作液
6、上下倾倒数次,混匀(限定在 3 秒之内)
7、即刻放进分光光度仪检测,此为背景空对照:
(0 秒读数-60 秒读数),正常读数差值为 0.001 至 0.005
(二)、样品活性测定
1、移取 800 微升缓冲液(Reagent A)到新的比色皿
2、加入 100 微升待测样品(注意:建议总量 2 微克线粒体蛋白)
3、上下倾倒数次,混匀
4、室温静置 3 分钟
5、加入 100 微升含有反应液(Reagent B)和稳定液(Reagent D)的工作液
6、上下倾倒数次,混匀(限定在 3 秒之内)
7、即刻放进分光光度仪检测,此为背景空对照:
(0 秒读数-60 秒读数),正常读数差值为正值

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