检测原理:
线粒体呼吸链复合物IV （Mitochondria Complex IV），又称为细胞色素C氧化还原酶（cytochrome c oxidoreductase）或细胞色素C氧化酶（Cytochrome c oxidase），存在于真核生物的细胞线粒体上，主要通过氧化磷酸化为细胞提供能量。呼吸链复合物IV是由13种不同的亚体构成的复合物，其中含有2个血红素（heme）基团（a和a3）和2
个铜原子，作为辅基（prosthetic groups）。呼吸链复合物IV的遗传变异导致氧化磷酸化类疾病，包括阿茨罕默综合症和肿瘤等。基于底物还原型细胞色素C（reducedcytochrome c），受到呼吸链复合物IV的催化，转化为氧化型细胞色素C（oxidizedcytochrome c），在分光光度仪下，出现吸光值的变化（550nm 波长），由此定量测定呼吸链复合物IV的活性。

试剂组成：（20 管/10 样)）
缓冲液（Reagent A） 20 毫升
反应液（Reagent B） 2 毫升
稀释液（Reagent C） 1 毫升
稳定液 A（Reagent D1） 1 管
稳定液 B（Reagent D2） 250 微升
半岛bd体育手机客户端 说明书 1 份

保存方式
缓冲液（Reagent A）和稀释液（Reagent C）保存在4°C冰箱里，其余的保存在－20°C冰箱里；反应液（Reagent B）避免光照；有效保证6月

用户自备
比色皿：用于比色分析的容器
双波长分光光度仪：用于比色分析
培养箱：用于孵育反应物
1.5 毫升离心管：用于反应液配制的容器

实验步骤
（一）、背景对照测定
1、移取 800 微升缓冲液（Reagent A）到新的比色皿
2、加入 100 微升稀释液（Reagent C）
3、上下倾倒数次，混匀
4、室温静置 3 分钟
5、加入 100 微升含有反应液（Reagent B）和稳定液（Reagent D）的工作液
6、上下倾倒数次，混匀（限定在 3 秒之内）
7、即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照：
（0 秒读数－60 秒读数），正常读数差值为 0.001 至 0.005
（二）、样品活性测定
1、移取 800 微升缓冲液（Reagent A）到新的比色皿
2、加入 100 微升待测样品（注意：建议总量 2 微克线粒体蛋白）
3、上下倾倒数次，混匀
4、室温静置 3 分钟
5、加入 100 微升含有反应液（Reagent B）和稳定液（Reagent D）的工作液
6、上下倾倒数次，混匀（限定在 3 秒之内）
7、即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照：
（0 秒读数－60 秒读数），正常读数差值为正值