游离脂肪酸,别名非酯化脂肪酸,是脂肪水解产物,测定血清脂肪酸可以了解脂肪代谢的情况,升高代表脂肪分解增加。
检测原理:
游离脂肪酸能与铜离子结合形成脂肪酸的铜盐而溶于氯仿中,其含量与游离脂肪酸含量成正比。用铜试剂测定其中铜离子的含量,即可推算出游离脂肪酸的含量。
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优点如下:
1、快速简便:全程约2小时,可测50例左右样本。
3、再现性好:变异系数CV=1.5%。
4、回收试验: X =96%。
5、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
6、测试面广:可测各种动物血清(浆)、组织,效果均佳。
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及自备试剂:
1、分光光度计(比色测定波长为440nm)
2、台式离心机
3、漩涡混匀器
4、微量移液器
试剂组成与配制(50 管/48 样):
试剂一:氯仿(三氯甲烷)(分析纯)自备。
试剂二:缓冲液,40ml×1 瓶,室温保存 6 个月。
试剂三:铜试剂,甲液 30ml×1 瓶,乙液 30ml×1 瓶,丙液 5ml×1 瓶,4°C保存 6 个月。
试剂三铜试剂的配制:按甲液∶乙液∶丙液=10∶9∶1 的比例进行配制,需多少配多少,配好后 4°C保存二周。
试剂四:显色剂,粉剂×2 支,稀释液 10ml×2 瓶,4°C保存 3 个月。
试剂四显色剂的配制:临用时将 1 支粉剂溶解于 1 瓶 10ml 稀释液中,配好后 4°C可保存二周。
试剂五:棕榈酸标准品粉剂×2 支,溶剂 50ml×1 瓶,4°C保存 1 个月。
1000μmol/L 棕榈酸标准品的配制:将一支粉剂用溶剂溶解后定容至 20ml
试剂六:双蒸水 40ml×1 瓶(做空白管用)。