丙酮酸激酶,是红细胞葡萄糖无氧酵解途经中三个限速酶之一,直接关系着红细胞能量代谢,此酶缺乏属常染色体隐性遗传,可能导致非球形红细胞溶血性贫血.丙酮酸激酶的功能是在糖直接酵解过程中起催化作用,将磷酸烯醇丙酮酸的磷酸递给二磷酸腺苷,使之磷酸化为高能量的三磷酸腺苷.丙酮酸激酶缺乏能使ATP的生成减少,因而影响红细胞膜得到功能,如果约定缩短红细胞的生存时间,造成溶血性贫血.同时血清丙酮酸激酶对判断心肌损伤也有很高的科研意义.
测定原理:
丙酮酸激酶(Pyruvate kinase. PK)在 ADP 存在下可催化 PEP 产生丙酮酸,丙酮酸再由LDH 将其转变为乳酸,同时将 NADH 变为 NAD。
半岛bd体育手机客户端 优点如下:
1、快速简便:速率法,30分钟可完成20-40例样本的测定。
2、取样量微:取样量仅为20l左右
3、稳定性好:试剂盒2~8℃存放3个月有效。
4、再现性好:变异系数CV=1.7%。
5、回收试验: X =101%。
6、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
7、测试面广:可测各种动物血清(浆)、组织等
所需半岛游戏平台官网入口网址 及自备试剂:
1、紫外分光光度计(比色测定波长为340nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、漩涡混匀器
4、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
操作流程:
1、取已预温10分钟的混合试剂加20l样本
2、340nm波长,0.5cm光径测OD值为A1
3、37℃水浴15分钟后,340nm波长,0.5cm光径测OD值为A2
储存条件:
本试剂盒保存期:3个月。贮存温度:2~8℃。特别提醒R2、R4、R5需放在-20℃以下冷冻保存