测定原理9br/> NOS 催化 L-Arg 和分子氧反应生成 NO,NO 与亲核性物质生成有色化合物,在 530nm波长下测定吸光度,根据吸光度的大小可计算 NOS 活力、br/> NOS 主要有两种类型:即结构型(cNOS)和诱导型(iNOS)。结构型(cNOS)主要存在于神经元和内皮细胞内,依赖钙;诱导型(iNOS)主要存在于巨噬细胞内,不依赖钙。根据此原理可以分型、br/>
产品优点如下9br/>1、快速简便:全程?0分钟,可?0例左右样本、br/>2、稳定性好:试剂盒2?℃存?个月有效,部分试?20℃保存、br/>3、再现性好:变异系数CV=1.7%、br/>4、回收试验: X =103.3%、br/>5、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强、br/>6、测试面广:可测动物血清(浆)、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织以及各种水产,效果均佳、/p>
试剂组成与配制(50 ?24 A014-1-1):
试剂一:底物缓冲液 6ml?2 瓶,-20?C 以下避光冷冻保存 3 个月。临用前化冻摇匀。没有用完的试剂,可?20?C 以下避光冷冻保存以备下次再用、br/>试剂二:促进剂淡黄色或白色粉?#61620;3 支,稀释液 0.6 ml?3 支?20?C 以下冷冻保存 6 个月。测试前取稀释液一 0.6ml 加入一支粉剂中充分混匀(即 1.5ml 小离心管反复颠倒,并将小离心管尖部的液体弹下来),测试后剩余试剂可放入-20?C 以下冷冻保存,时间不超过一周。若发现粉剂变成黄褐色或咖啡色,则不可以再用、br/>试剂三:显色剂(黄色?ml?1 瓶,4?C 避光冷藏保存 3 个月、br/>试剂四:透明 6ml?1 瓶,室温保存 6 个月。天冷后会凝固,37°C水浴变澄清时再使用、br/>试剂五:终止 60ml?2 瓶,4?C 保存 6 个月。室温低会出现浑浊,37°C水浴至透明再用、br/>试剂六:液体 10ml×1 瓶,4°C保存 6 个月。用前请仔细观察,如有结晶附着在瓶壁或瓶底,可将试剂连同瓶子一起在 90?00°C热水中摇晃等其完全溶解后,即可使用、br/>
所需仪器及自备试剂:
1、分光光度计(比色测定波长为530nm(br/>2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀?br/>5、微量移液器