乳酸是糖无氧氧化(糖酵解)的代谢产物。乳酸产生于骨胳,肌肉,脑和红细胞。经肝脏代谢后由肾分泌排泄。血乳酸测定可反映组织氧供和代谢状态以及灌注量不足。乳酸水平的增高可见于多种临床疾病。
测定原理:
以 NAD+ 为氢受体,LDH 催化乳酸(Lactic Acid)脱氢产生丙酮酸,使 NAD+ 转化成NADH。其中 PMS 递氢使 NBT 还原为紫色呈色物,呈色物的吸光度在 530nm 时与乳酸含量成线性关系。
半岛bd体育手机客户端 优点如下:
1、快速简便:全程约30分钟,可测50例左右样本。
2、取样量微:本法取样量20ul-50ul即可
3、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
4、再现性好:变异系数CV=1.7%。
5、回收试验: X =100%。
6、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
7、测试面广:可测动物血清(浆)、组织、发酵液、培养细胞、培养细胞上清、红细胞等。
试剂组成及配制:(50 管/48 样)
试剂一:酶稀释液 60ml×1 瓶,2°C~8°C保存 6 个月。
试剂二:酶贮备液 0.6 ml×1 支, 2°C~8°C保存 6 个月。
酶工作液配制:临用前将试剂二(酶贮备液)和试剂一(酶稀释液)按照 1︰100 的体积比进行混合,现用现配,2°C~8°C保存 24 小时内有效。
试剂三:黄色透明液体 6 ml×2 瓶,2°C~8°C避光保存 6 个月。
试剂四:粉剂×2 支,短期内使用可放 4°C~8°C冰箱,长期(6 个月)存放请置-20°C以下。
显色剂的配制:使用前取试剂四粉剂 1 支倒入 1 瓶试剂三液体中,待粉剂全部溶解后,用微量移液器取少许液体打入小离心管中,反复颠倒离心管,再用微量移液器将离心管中的液体转移到瓶中,如此反复 2~3 次,使二者充分混合,配成显色剂,2°C~8°C避光保存 2 周内有效。
试剂五:终止液,60 ml×2 瓶,2°C~8°C保存 6 个月。
试剂六:3 mmol/L 标准品,2 ml×1 支,2°C~8°C保存 6 个月。
所需半岛游戏平台官网入口网址 及自备试剂:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为530nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、漩涡混匀器
4、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
操作流程:
1、按步骤加入样本、酶工作液、显色剂
2、漩涡混匀,37℃孵育10分钟
3、加入终止剂终止反应
4、530nm波长,1cm光径,比色
储存条件:
本试剂盒保存期:6个月。贮存温度:2~8℃。特别提醒R4试剂需-20?C以下冷冻保存。