1 实验部分

1.1 半岛游戏平台官网入口网址 配置

LC1620A Plus 高效液相色谱仪泵一台

RI-201H 示差折光检测器1 台，

ERC-3215 在线脱气机一台

AD 适配器一套

GMP 软件一套

SHODEX NH2P- 50 4E 4.6mm*250mm 色谱柱一根

FA2004 电子分析天平(上海舜宇恒平科学半岛游戏平台官网入口网址 有限公司)；

果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖标准品(>97%，国药试剂)；

乙腈(色谱纯，美国Tedia)；

纯净水(杭州娃哈哈)。

1.2 标准品溶液配制

分别精密称取果糖对照品1.0g，葡萄糖对照品0.8g，置同一具塞锥形瓶中，精密加入40% 乙腈20ml，溶解，摇匀，作为果糖、葡萄糖对照品储备液。另精密称取蔗糖对照品0.2g，麦芽糖对照品0.2g，置同一具塞锥形瓶中，精密加人40 %乙腈10ml，溶解，摇勻，作为蔗糖、麦芽糖对照品储备液。分别精密量取果糖、葡萄糖对照品储备液和蔗糖、麦芽糖对照品储备液，加4 0 %乙腈配成不同浓度的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖混合对照品溶液。

序号	混标浓度(mg/ml)
	果糖	葡萄糖	蔗糖	麦芽糖
1	10	8	0.5	0.5
2	15	12	1.0	1.0
3	20	16	2.0	2.0
4	25	20	4.0	4.0
5	30	24	6.0	6.0

1.3 样品前处理

取蜂蜜约lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加人4 0 %乙腈20ml，溶解，摇匀，滤过，取续滤液，作为样品溶液。

1.4 色谱条件：

色谱柱：Shodex NH2P-50 4E(4.6×250mm)

流动相：乙腈/水=75/25

流速：1.0ml/min

柱温：30℃

进样量：20ul

2 实验结果

2.1 标准曲线

将一系列浓度的标准溶液由低浓度到高浓度进样，以峰面积(纵坐标Y 轴)对标准品浓度(横坐标X 轴，mg/ml)进行线性回归，求算标准曲线，结果如下：

2.2 含量测定

2.2.1 样品中糖含量的测定

按“样品前处理” 操作制备样品，按上述所建立的HPLC 方法，对蜂蜜样品进行了分析。测定结果计算如下：

表1 蜂蜜含量的测定结果

项目	A/果糖	A/葡萄糖	A/蔗糖	A/麦芽糖
含量mg/ml	21.1680	17.0152	0.0864	1.3158
含量(%)	39.4788	38.3485	0.1754	1.5156

药典要求葡萄糖+果糖>60%，果糖/葡萄糖>1，蔗糖和麦芽糖<5%，符合药典要求。

蜂蜜样品的HPLC 谱图

3 结论

使用 LC1620Plus 泵配合 shodex 示差检测器，按药典方法操作，四种糖在Shodex NH2P-50 氨基柱上能得到良好的分离效果，按 3 倍噪声值计算，理论检出限为 0.2mg/ml，符合 2015 版药典的要求。