磺胺二甲嘧啶检测试剂盒操作步骤:
1、将试剂盒从冷藏环境中取出并将所需试剂从试剂盒取出,置室温(20-25℃)平衡30min以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
2、配液:将40ml浓缩洗涤液(20倍浓缩)用去离子水稀释至800ml备用(或按需量稀释),稀释好的洗涤液在4℃
环境可保存一个月,使用前也需回温。
3、取出板架及需要数量的微孔板,将不用的微孔板重新密封,保存于2-8℃不要冷冻。
4、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品均需做2孔。
5、将浓缩抗体用已稀释好的复溶液11倍稀释(1份抗体加入10份稀释液)。
6、加标准品/样本50μl/孔,然后加已稀释好的抗体50μl/孔,用盖板膜盖板,25℃环境中反应60min,取出用洗涤液每孔加250ml,洗板5次,每次10秒,拍干(拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破)。
7、加酶标二抗:每孔加入100ml,用盖板膜盖板后置25℃环境中反应30min。取出用洗涤液每孔加250ml,洗板5次,每次10秒,拍干(拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破)。
8、显色:每孔加入显色剂A液50ml,再加B液50ml,轻轻振荡混匀,25℃环境中避光显色30min。
9、测定:每孔加入终止液50ml,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于450nm处(建议用双波长450/630nm检测,在5min内读完数据),测定每孔OD值。