猪肠道杯状病毒RT-LAMP试剂盒实骋/span>使用方法:
一、猪肠道杯状病毒RT-LAMP试剂?0次稀释标准曲线样品( 10E2-10E7 拷贝/μL 6 10 倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)、/span>
1. 标记 6 个离心管,分别为 7?????、/span>
2. 用带芯枪头分别加 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液?用带芯枪头,下同)、/span>
3. 7 号管中加 5 μL 阳性对照(浓度 1×10E8 拷贝/μL,试剂盒提供),充分震 1 分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用、/span>
4. 换枪头, 6 号管中加 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对?上步稀释所?,充分震 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用、/span>
5. 换枪头, 5 号管中加 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对?上步稀释所?,充分震 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用、/span>
6. 重复上面的操作直到得 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用、/span>
二、样 DNA 的制夆/span>
7. 用自选方法纯化样品的 DNA,本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容、/span>
8. 如果 N 个样品,则需要进 N+2 个样品提取,多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管、/span>
三、设 qPCR 反应?0μL 体系,在样品制备室进行)
9. 如果做定量分析并且只 1 次重复,则标 N+9 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用 PCR 阴性对照(用水做模板)? 个用于标准曲线。如果做定性分析,并且只做 1 次重复,则标 N+4 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用 PCR 阴性对照(用水做模板)? 个用于PCR 阳性对照、/span>