犬肿瘤坏死因子βelisa检测试剂盒实验操作技巧
1.操作前应对试验的物理参数有充分的了解,如环境温度(保持在18 C~25℃)、反应孵育温度和孵育时间、洗刷的次数等,要先查看水育箱温度,ELISA试剂盒是否符合要求。
2.正确使用加样器加样器应笔直参加标本或试剂,避免刮擦包被板底部。加样过程中避免液体外溅,血清残留在反应孔壁上,加样器吸头要清洗干净,避免污染,加样次第要与说明书一起,否则可导致效果过错,试验重复性差。
3.手工洗板加洗液时冲击力不要太大,洗刷次数不要逾越说明书举荐的洗刷次数,洗液在反应孑L内停留的时间不宜太长。不要使洗液在孑L间窜流,形成孔问污染,导致假阴性或假阳性。
4.要保证加液量一起 我们在使用时感觉滴瓶加液不如加样器好,滴瓶不易控制加液量禁绝,形成显色不一致,判别过错。
5.显色液量不可过多 加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下,加显色系统后要避光反应,显色液量不能过多,避免显色过强。
为了减小过失,是先稀释再加样。而针对这位客户所遇到的疑问,我公司技术人员是这样说明的:
1. 前者测的是稀释和移液的过失,后者只需移液过失。
2. 一般都是稀释一次,分两孔吧。同浓度的分复孔。
3. 由于是从同一原液稀释,一般不考虑稀释过失(稀释过失是存在的),都是稀释到想要的倍数直接分孔(而不是逐个稀释,这样可以使稀释过失减小)。
4. 复孔是为了扫除移液体积,板的影响,以及其他系统过失的,要求复孔的浓度是一起的。稀释后分孔能满意此要求,逐个稀释不能。