特性：

RH-35(肝癌细胞)安全性：所有肿瘤和病转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后，在倒置镜下好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml新鲜培养液后继续培养。

(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒放于37℃培养箱1-3分钟预热，之后翻转培养瓶10-30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。

特性：

安全性：所有肿瘤和病转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后，在倒置镜下好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml新鲜培养液后继续培养。

(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒放于37℃培养箱1-3分钟预热，之后翻转培养瓶10-30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。

细胞特性：

1)组织来源于实验动物的正常眼组织。

2)细胞鉴定：细胞角蛋白-18(CK-18)免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：上皮样，不规则细胞，贴壁培养。

注意事项：

1、观察细胞zui好在低倍镜（4或5X物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。

2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。

3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。

4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与我们。

ZKSCAN1 ELISA KitRat Reg3b(RegeneRating islet-derived protein 3-beta) ELISA Kit无水草酸动物组织醛酮还原酶1A（aldo-keto reductase 1A）活性比色法定量检测试剂盒

ZNF146 ELISA KitRat Plp1(Myelin proteolipid protein) ELISA Kit无水草酸动物组织醛酮还原酶1B（aldo-keto reductase 1B）活性比色法定量检测试剂盒

ZMPSTE24 ELISA KitRat Jak3(Tyrosine-protein kinase JAK3) ELISA Kit十八醇动物组织醛酮还原酶1C（aldo-keto reductase 1C）活性比色法定量检测试剂盒

ZFYVE16 ELISA KitRat Sirt2(NAD-dependent deacetylase sirtuin-2) ELISA KitOrphenadrine Citrate动物组织醛酮还原酶1D（aldo-keto reductase 1D）活性比色法定量检测试剂盒

ZFYVE19 ELISA KitRat Pde4b(cAMP-specific 3',5'-cyclic phosphodiesterase 4B) ELISA KitOrphenadrine Citrate动物组织醛酮还原酶1E（aldo-keto reductase 1E）活性比色法定量检测试剂盒

ZMYND10 ELISA KitRat Pde5a(cGMP-specific 3',5'-cyclic phosphodiesterase) ELISA Kit奥利沙铂细胞钙蛋白酶（CALPAIN）活性荧光定量检测试剂盒

ZMYND12 ELISA KitRat Prdx4(Peroxiredoxin-4) ELISA Kit奥利沙铂组织钙蛋白酶（CALPAIN）活性荧光定量检测试剂盒

ZFYVE27 ELISA KitRat Ghrh(Growth Hormone Releasing Hormone) ELISA Kit6-氯苯并三氮唑-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸酯体液钙蛋白酶（CALPAIN）活性荧光定量检测试剂盒

NR1D2 ELISA Kitp53AIP1  p53调节凋亡诱导蛋白1抗体三(4-甲氧苯基)膦醋酸轻松进口/国产SMARCA1/SNF2L  解旋酶SNF2L抗体含量：含量测定

NR2B ELISA KitAPOL6  载脂蛋白样蛋白6抗体三(4-甲氧苯基)膦醋酸地孕进口/国产ACBD6  酰辅酶A结合结构域蛋白6抗体含量：鉴别

NR2C1(Nuclear receptor subfamily 2 group C member 1) ELISA KitARTS  凋亡相关蛋白TGFb信号抗体凝血酶醋酸泼尼松进口/国产ACVR1B/ALK4  激活A受体1B抗体含量：含量测定

NR2C2(Nuclear receptor subfamily 2 group C member 2) ELISA KitBif  Bax相互作用因子1抗体百里香酚蓝地高辛进口/国产ACY1/Aminoacylase 1  氨酰化酶1抗体含量：UV法含量测定用

NRF1 ELISA KitCLIC4  细胞内氯离子通道蛋白4抗体四溴化碳地塞米松酸钠进口/国产ACVRL1/ALK1  激活受体样激酶1抗体含量：含量测定

NPB ELISA KitPLSCR3  磷脂爬行酶3抗体四溴化碳氨酸进口/国产ASAH2  酰鞘氨醇脱酰酶2抗体含量：含量测定

NRIP2 ELISA KitPNPT1  多核苷酸磷酸化酶蛋白抗体四溴化碳对酰氨酚进口/国产ASAM/ACAM  脂肪细胞特异性粘附分子抗体含量：检查

CRH(Corticotropin Releasing Hormone) ELISA KitAIF  调亡诱导因子抗体四氢吡喃-4-甲酸泛影酸进口/国产CARPX/CA10  碳酸酶相关蛋白抗体（脑蛋白15）含量：鉴别

实验报告：

一、分离与培养：

    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；

    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；

    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗（Abbioscience公司），然后将其放在4℃箱中孵育细胞过夜；

    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

    6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。