【细胞冻存】

半岛bd体育手机客户端 名称待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

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细胞的种类：

第×种：

是冻存半岛bd体育手机客户端 ，由液氮直接拿出，干运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响半岛bd体育手机客户端 的质量；干运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。

第二种：

是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。

质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的半岛bd体育手机客户端 全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。

【培养指南】

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

【复苏的原则】

快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的晶迅速融化，避免晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。

细胞培养的优点：

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种半岛游戏平台官网入口网址 设备。
PAPOLB ELISA KitBOD1  双向染色体细胞分裂蛋白1抗体3-氨甲基噻吩盐酸吐根酚进口/国产ADAM2  去整合样金属蛋白酶2抗体含量：HPLC≥98%

PAPOLG ELISA Kitphospho-ANAPC1(Ser377)  磷酸化细胞周期末期促进复合蛋白APC1抗体5-氯-2-(2,4-二氯苯氧基)苯酚盐酸药根进口/国产MLCK  肌球蛋白轻链激酶抗体含量：HPLC≥98%

PAPSS1 ELISA KitAgrin  聚集蛋白抗体5-氯-2-(2,4-二氯苯氧基)苯酚白屈菜红进口/国产Acetyl-Histone H4(K5)  酰化组蛋白H4抗体含量：HPLC≥98%

PAK6(Serine/threonine-protein kinase PAK 6) ELISA KitCENPT  着丝粒蛋白T抗体5-氯-2-(2,4-二氯苯氧基)苯酚血根进口/国产Acetyl-Histone H4(K16)  酰化组蛋白H4(K16)抗体含量：HPLC≥98%

PAK4 ELISA KitRanGAP1  RAN GTPase酶激活蛋白1抗体维生素 B1两面针进口/国产AFP  胎蛋白抗体含量：HPLC≥98%

PALB2 ELISA KitPRC1  胞质分裂调控蛋白1抗体维生素 B1高三尖杉酯进口/国产AEV(Avian Encephalomyelitis virus)  禽脑脊髓炎病AEV抗体含量：HPLC≥98%

PAMR1 ELISA KitCDCREL/SEPT5  细胞周期调控相关蛋白1三甲基氧鎓四氟硼酸盐芦竹进口/国产ADAM17/CD156b  肿瘤坏死因子α转换酶含量：HPLC≥98%

BRCA1(Breast cancer type 1 susceptibility protein) ELISA KitSEPT6  细胞分化蛋白SEPT6抗体三甲基氧鎓四氟硼酸盐利血平进口/国产PGT/Slco2a1  溶质载体蛋白家族21成员2抗体含量：HPLC≥98%
SK-BR-3(乳腺腺癌细胞)AIF1L (Allograft inflammatory factor 1-like) ELISA KITRat ADP/Acrp30(Adiponectin) ELISA KitN-Boc-2,5-二氢-1H-吡咯细菌乙醇脱氢酶总活性（NDMA）比色法定量检测试剂盒

AAGAB (Alpha- and gamma-adaptin-binding protein p34) ELISA KITRat ANG-1(Angiopoietin-1) ELISA KitN-Cbz-L-高丝氨酸内酯酵母乙醇脱氢酶总活性（NDMA）比色法定量检测试剂盒

AGPS (Alkyldihydroxyacetonephosphate synthase, peroxisomal) ELISA KITRat BDNF(Brain Derived Neurotrophic Factor) ELISA KitN-Cbz-L-高丝氨酸内酯植物乙醇脱氢酶总活性（NDMA）比色法定量检测试剂盒

ADRB2 (Beta-2 adrenergic receptor) ELISA KITRat Beta cellulin/BTC(Beta Cellulin) ELISA Kit2-硝基苯甲醚细胞乙醇脱氢酶I活性荧光定量检测试剂盒

ALMS1 (Alstrom syndrome protein 1) ELISA KITRat BMP-2(Bone Morphogenetic Protein 2) ELISA Kit2-硝基苯甲醚组织乙醇脱氢酶I活性荧光定量检测试剂盒

ADRA1D (Alpha-1D adrenergic receptor) ELISA KITRat TLR7(Toll-Like Receptor 7) ELISA Kit橙花醇血液乙醇脱氢酶I活性荧光定量检测试剂盒

AMER1 (APC membrane recruitment protein 1) ELISA KITRat IFN-γ(Interferon γ) ELISA Kit橙花醇细胞乙醇脱氢酶II活性荧光定量检测试剂盒

AMBN (Ameloblastin) ELISA KITRat GP4/CD36(Platelet Membrane Glycoprotein IV) ELISA Kit4-硝基邻苯二甲腈组织乙醇脱氢酶II活性荧光定量检测试剂盒