特性：

T-47D(乳腺管癌细胞)安全性：所有肿瘤和病转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后，在倒置镜下好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml新鲜培养液后继续培养。

(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒放于37℃培养箱1-3分钟预热，之后翻转培养瓶10-30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。

特性：

安全性：所有肿瘤和病转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后，在倒置镜下好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml新鲜培养液后继续培养。

(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒放于37℃培养箱1-3分钟预热，之后翻转培养瓶10-30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。

细胞特性：

1)组织来源于实验动物的正常眼组织。

2)细胞鉴定：细胞角蛋白-18(CK-18)免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：上皮样，不规则细胞，贴壁培养。

注意事项：

1、观察细胞zui好在低倍镜（4或5X物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。

2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。

3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。

4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与我们。

ANTXR1(Anthrax toxin receptor 1) ELISA KitPorcine FE(Ferritin) ELISA KitN-(1-(苯基乙酰基)-L-脯氨酰)甘氨酸乙酯细胞多聚ADP核糖聚合酶－1（PARP-1）活性比色法定量检测试剂盒

AMHR2 (Anti-Muellerian hormone type-2 receptor) ELISA KITPorcine AST(Aspartate aminotransferase) ELISA Kit2'-硝基苯乙酮组织多聚ADP核糖聚合酶－1（PARP-1）活性比色法定量检测试剂盒

EHMT2 (Histone-lysine N-methyltransferase EHMT2) ELISA KITPorcine MMP14(Matrix metalloproteinase-14) ELISA Kit2'-硝基苯乙酮细胞多聚ADP核糖聚合酶－1（PARP-1）活性荧光定量检测试剂盒

DIO1(Type I iodothyronine deiodinase) ELISA KitPorcine GAL3(Galectin 3) ELISA Kit2'-硝基苯乙酮组织多聚ADP核糖聚合酶－1（PARP-1）活性荧光定量检测试剂盒

ADORA1(Adenosine receptor A1) ELISA KitPorcine HMGB1(High mobility group protein B1) ELISA Kit诺氟沙星细胞异柠檬酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒

AMMECR1L (AMMECR1-like protein) ELISA KITPorcine IL-27A(Interleukin-27 subunit alpha) ELISA Kit诺氟沙星组织异柠檬酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒

AEN (Apoptosis-enhancing nuclease) ELISA KITPorcine A-GHR(Acylated ghrelin) ELISA Kit诺氟沙星尿酶活性比色法定量检测试剂盒

AMN (Protein amnionless) ELISA KITPorcine DCN(decorin) ELISA KitN-乙酰-L-谷氨酸细胞乙醇脱氢酶总活性比色法定量检测试剂盒

PAMR1 ELISA KitxCT/CCBR1  钙离子通道阻端耐药蛋白CCBR1抗体四丁基氟化铵2,3,5,4-四羟二葡萄糖苷进口/国产MARK4  丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MARK4抗体含量：HPLC≥98%

PAN2 ELISA KitTSSC3  肿瘤抑制转移候选基因3抗体睾酮（睾甾酮）贝母进口/国产phospho-MARK4(Ser423)  酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MARK4抗体含量：HPLC≥99%

BRCA1(Breast cancer type 1 susceptibility protein) ELISA KitTTI1  转录因子相互作用蛋白1抗体三辛胺贝母进口/国产phospho-TCF3/E2A/E47(Ser39)  酸化转录因子3抗体含量：HPLC≥99%

PANK1 ELISA KitWDR61  WD重复膜蛋白61抗体三辛胺连翘苷进口/国产IgHV/IgH  免疫球蛋白重链可变区抗体含量：HPLC≥98%

PANK2 ELISA KitRBR2/Rb2 p130  视网膜母细胞瘤样蛋白2抗体四甲基硝酸铵三七皂甙R1进口/国产Mammaglobin A  珠蛋白1抗体含量：HPLC≥98%

PAICS(Multifunctional protein ADE2) ELISA KitBRCC3/BRCC36  乳腺癌易感基因复合物亚基蛋白3抗体四甲基硝酸铵酸枣仁皂甙A进口/国产ADK/AK  苷酸激酶抗体含量：HPLC≥98%

PAGE2 ELISA KitCasein Kappa/CSN3/COPS3  K-酪蛋白抗体可可碱酸枣仁皂甙B进口/国产AEG-1/LYRIC  AEG-1抗体含量：HPLC≥98%

PANK3 ELISA KitCXXC5  二硫键氧化还原酶锌指蛋白5抗体可可碱酸枣仁皂甙D进口/国产AMH/MIS  Muellerian缪勒管激抑制因子抗体含量：HPLC≥98%

实验报告：

一、分离与培养：

    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；

    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；

    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗（Abbioscience公司），然后将其放在4℃箱中孵育细胞过夜；

    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

    6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。