禽流感病毒N亚型(AIV-N)核酸试剂盒PCR反应的特异性决定因素为：

　　　①引物与模板DNA特异正确的结合；

　　　②碱基配对原则；

　　　③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；

　　　④靶基因的特异性与保守性。

其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。

(2) 灵敏度高

PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。

(3) 简便、快速

PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。

(4) 对标本的纯度要求低

不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

【对检验结果的解释】

1. 实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染会出现假阳性结果；

2. 试剂运输、保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，可能会导致出现假阴性结果。

半岛bd体育手机客户端 名称	英文名称	编号
禽流感病毒N亚型(AIV-N)核酸试剂盒	详见说明书	GOY-M1631

规格：50T
分类：PCR检测试剂盒

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

运输：低温、避光。

有效期：一年

货期：现货PCR试剂盒的有效期一般为1年，这是指在适当的储存温度下。核酸扩增部分的试剂一般要贮存于-20℃下，产物检测部分试剂则贮存于2-8℃。尽量避免反复冻融。

【结果分析条件设定】

u 基线（Baseline）设定：应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域（所有样本荧光信号无较大波动），起始点（Start）应避开荧光采集起始阶段的信号波动，终止点（End）应比最早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环，建议基线设为6~15。

u 阈值(Threshold)设定：将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的最高点。
【质控标准】

1. 阴性质控品的检测结果应为阴性，无指数扩增期，Ct=40或无Ct；

2. 阳性质控品的检测结果应为阳性，有明显的指数扩增期，Ct值应小于等于35；

3. 以上要求需在一次实验中同时满足，否则该次实验视为无效。

【结果判断】

1. 阳性：有明显的指数扩增期，且Ct＜38；

2.可疑：有明显的指数扩增期，且38≤Ct<40，此时样本为可疑样本；对于可疑样本建议复核一次，若复核结果Ct<40且有指数扩增期，则判定为阳性，否则判定为阴性；

3. 阴性：无指数扩增期，Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。

β-casein β-酪蛋白抗体氢溴酸加兰他敏

BAFF/CD257 TNF家族B细胞激活因子抗体炔雌醇

BAFFR/CD268 B细胞活化因子受体抗体炔诺酮

bFGF/FGF2 碱性成纤维细胞生长因子抗体4-N-去甲基安乃近

Staphyloccocus aureus Rosenbach tropina 金黄色葡萄球菌菌体蛋白抗体曲安奈德

Shigella tropina 志贺氏菌菌体蛋白抗体乳果糖

BGP/Osteocalcin 骨保护蛋白/骨钙素抗体乳糖

Bid BH3结构域凋亡诱导蛋白抗体美法仑

phospho-Bid (Ser65) 磷酸化BH3结构域凋亡诱导蛋白抗体酞丁安

phospho-Bid(Ser61) 磷酸化BH3结构域凋亡诱导蛋白抗体维生素D3
禽流感病毒N亚型(AIV-N)核酸试剂盒Hoechst 33342染色液5mg

IASPP(inhibitory member of the ASPP family)ATF1 (Activating Transcription Factor1)磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i

CD54/ICAM1NPS/Neuropeptide S白介素8

IL1 Beta(Interleukin1 Beta)NKB (Neurokinins B)Iroquois同源蛋白5

IL1RAPL1 (Interleukin 1 receptor accessory proteinlike 1)ATF2 (Activating Transcription Factor2)整合素αEIntegrin αE

IL6(Interleukin6)phosphoATF2(pSer490/pSer498)细胞间粘附分子2

IL10(Interleukin10)NKR ； Neurokin B receptor (Neuromedin K receptor; NK4 receptor)整合素β3

IL8ATF3 (Activating Transcription Factor3)整合素α4

Insulin Receptor(ISR)ATM(ataxia telangiectasia mutated)白介素15
组成及试剂配制:

1、酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。