组成及试剂配制:

1、酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

半岛bd体育手机客户端 名称	英文名称	编号
志贺菌ipaH 基因荧光PCR(探针法)试剂盒	详见说明书	GOY-M1560

规格：50T
分类：PCR检测试剂盒

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

运输：低温、避光。

有效期：一年

货期：现货PCR试剂盒的有效期一般为1年，这是指在适当的储存温度下。核酸扩增部分的试剂一般要贮存于-20℃下，产物检测部分试剂则贮存于2-8℃。尽量避免反复冻融。

【结果分析条件设定】

u 基线（Baseline）设定：应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域（所有样本荧光信号无较大波动），起始点（Start）应避开荧光采集起始阶段的信号波动，终止点（End）应比最早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环，建议基线设为6~15。

u 阈值(Threshold)设定：将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的最高点。

【质控标准】

1. 阴性质控品的检测结果应为阴性，无指数扩增期，Ct=40或无Ct；

2. 阳性质控品的检测结果应为阳性，有明显的指数扩增期，Ct值应小于等于35；

3. 以上要求需在一次实验中同时满足，否则该次实验视为无效。

【结果判断】

1. 阳性：有明显的指数扩增期，且Ct＜38；

2.可疑：有明显的指数扩增期，且38≤Ct<40，此时样本为可疑样本；对于可疑样本建议复核一次，若复核结果Ct<40且有指数扩增期，则判定为阳性，否则判定为阴性；

3. 阴性：无指数扩增期，Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。

【对检验结果的解释】

1. 实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染会出现假阳性结果；

2. 试剂运输、保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，可能会导致出现假阴性结果。

志贺菌ipaH 基因荧光PCR(探针法)试剂盒PCR反应的特异性决定因素为：

　　　①引物与模板DNA特异正确的结合；

　　　②碱基配对原则；

　　　③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；

　　　④靶基因的特异性与保守性。

其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。

(2) 灵敏度高

PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。

(3) 简便、快速

PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。

(4) 对标本的纯度要求低

不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

表皮生长因子标准品Hepatitis C virus，core视黄醇结合蛋白4白术内酯Ⅱ

白血病抑制因子标准品Hepatitis C virus，core +NS3 + NS4人附睾蛋白4 his tag蟾毒灵

重组人血管内皮生长因子165国际标准品Hepatitis C virus，E1TOOS/N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐胆红素

流感抗原生物检定参考物Hepatitis C virus，E2HDAOS/N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐断血流皂苷A

甲肝免疫球蛋白抗体Hepatitis C virus ，helicaseMAOS/N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲基苯胺钠盐香紫苏醇

β-2微球蛋白Hepatitis C virus，NS3ADOS/N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基l)-3-甲氧基苯胺钠盐瑞香素

流感疫苗检测用抗体标准品（15/150）Hepatitis C virus，NS4TOPS /N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐重楼皂苷I

流感疫苗检测用抗体标准品（16/182）Hepatitis C virus，NS4aADPS/N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲氧基苯胺钠盐鼠尾草酚

流感疫苗检测用抗原标准品（H7N9）Hepatitis C virus ，NS4a+bALPS /N-乙基-N-(3-磺丙基)苯胺钠盐獐牙菜苷

流感疫苗检测用抗原标准品（16/118）Hepatitis C virus，NS4bDAOS/N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐石杉碱甲

流感疫苗检测用抗原标准品（16/298）Hepatitis C virus，NS5MADB/N,N-二(4-磺丁基)-3,5-二甲基苯胺钠盐告达亭苷元

重组人α-干扰素（白细胞）Hepatitis C virus，NS5a乙酰辅酶A氧化酶青阳参苷元B

血红蛋白A2裂解液（发酵培养的）Hepatitis C virus，NS5b胆固醇氧化酶圣草次苷

重组血红蛋白F裂解液（发酵培养的）Anti-HCV core antigen?Antibody尿酸酶草乌甲素

重组人促黄体生成激素抗原HCV (Biotin) Antigen谷氨酸脱氢酶α-倒捻子素

CE（欧洲质量检测许可）认证的抗人风疹病毒抗体HCV Antigen丙酮酸激酶3-异倒捻子素

合成埃博拉RNA（NP-VP35-GP型）HCV Antigen,甘油激酶地肤子皂苷Ic

抗双链DNA抗体（非WHO参考物质）HCV Antigen-加臂嘌呤核苷磷酸化酶2”-O-没食子酰基金丝桃苷

多瘤病毒DNAHepatitis D antigenα-葡萄糖苷酶盐酸石蒜碱

人类细小病毒B19核酸扩增试剂HEV ORF2 Protein葡萄糖脱氢酶

乙肝病毒DNA（冻干）HEV?ORF2/3?ProteinD-乳酸脱氢酶

人类疱疹病毒4型核酸扩增试剂HEV ORF2/ORF33-α羟基类固醇脱氢酶

人类巨细胞病毒核酸扩增试剂Anti-HEV-GL-同型半胱氨酸甲基转移酶

人类疱疹病毒1型核酸扩增试剂HEV Antigen,S腺苷同型半胱氨酸水解酶（SAHH）

艾滋病毒2型RNAHEV ORF2 AntigenS腺苷甲硫氨酸合成酶

人凝血因子8和vWF(血友病因子)重组蛋白HEV/ORF2 1 型N-乙酰神经氨糖酸醛缩酶

流感疫苗检测用抗体标准品（16/304 ）HEV/ORF2 4 型果糖氨基酸氧化酶

流感疫苗检测用抗体标准品（15/312）HEV/ORF2 Antigen神经氨酸苷酶/唾液酸酶，NRH

流感疫苗检测用抗体标准品（H7N9）HEV-1?ORF2?antibody肝素锂

肺炎链球菌质控血清生物检定参照物HEV-1?ORF2+ORF3?antigen乙二胺四乙酸二钾/EDTA二钾

抗梅毒血浆IgG，IgM国际标准品抗体HEV-2?ORF2?antigen血清分离胶/血液分离胶

百日咳杆菌FHA抗血清HEV-3?ORF2?antigen肝素抗凝剂

鼠抗人CD4单克隆抗体生物检定参照物HEV-4?ORF2?antibody乙二胺四乙酸三钾/EDTA三钾

志贺菌ipaH 基因荧光PCR(探针法)试剂盒6羧基X罗丹明（单一化合物）5mg

ACTHRDreamTaq? Green PCR Master Mix (2X)200 react小鼠脑钠素/脑钠尿肽(BNP)免疫试剂盒

AGRPDreamTaq Green PCR Master Mix200 rxns小鼠脑脊髓炎病毒(EV)(IgG)免疫试剂盒

AdrenodoxinDreamTaq? Green PCR Master Mix (2X)1000 react小鼠脑啡肽原B(PDYN)免疫试剂盒

AdracalinDreamTaq Green PCR Master Mix1000 rxns小鼠脑啡肽原A(PENK)免疫试剂盒

AAV5 capsid protein VP1Fast TissuetoPCR Kit200 react小鼠脑肠肽(BGP/Gehrelin)免疫试剂盒

ALDH3A2Fast TissuetoPCR Kit200 rxns小鼠内脂素/内脏脂肪素(visfatin)免疫试剂盒

AVPR1AInsTAclone? PCR Cloning Kit10 react小鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)免疫试剂盒

AVPR1BInsTAclone? PCR Cloning Kit30 react小鼠内皮脂肪酶(EL)免疫试剂盒