Sanger娴嬪簭鎶€鏈?/strong>
涓€浠f祴搴忥紝鍙堢ОSanger娴嬪簭锛屾槸鐢盨anger鏁欐巿浜?975骞村彂鏄庣殑涓€绉嶇О涓洪摼缁堟娉曠殑鎶€鏈紝鐢ㄦ潵娴嬪畾DNA搴忓垪锛岃繖绉嶆柟娉曚篃绉板仛鈥滃弻鑴辨哀缁堟娉曗€濇垨鏄€滄鏍兼硶鈥濄€傚叾鏍稿績鍘熺悊鏄噰鐢╠dNTP鍙栦唬dNTP锛屽湪鍚堟垚鏍搁吀閾剧殑杩囩▼涓璬dNTP鏃犳硶褰㈡垚纾烽吀浜岄叝閿紝浠庤€屽鑷碊NA鍚堟垚鍙嶅簲涓柇銆傚姣忎釜ddNTP杩涜鑽у厜鏍囪锛屼骇鐢熶互A銆乀銆丆銆丟缁撴潫鐨勫洓缁勪笉鍚岄暱搴︾殑涓€绯诲垪鏍歌嫹閰革紝鐒跺悗閫氳繃姣涚粏绠$數娉宠繘琛屽垎绂伙紝閫氳繃妫€娴嬭崸鍏変俊鍙疯幏寰桪NA搴忓垪銆侟/p>
涓€浠f祴搴忔渶澶х殑浼樺娍灏卞湪浜庡畠鍏锋湁杈冮珮鐨勫噯纭€э紝琚О涓烘祴搴忚涓氱殑鈥滈噾鏍囧噯鈥濓紝浣嗗悓鏃跺彈闄愪簬閫氶噺浣庯紝瀵逛簬澶ф牱鏈殑娴嬪簭鎴愭湰杈冮珮銆傜洰鍓嶄竴浠f祴搴忎富瑕佸簲鐢ㄤ簬灏戦噺DNA鍒嗗瓙娴嬪簭瀹為獙銆傚瀵硅川绮掋€丳CR浜х墿銆佸崟鍩哄洜绐佸彉鑷寸梾鍩哄洜浣嶇偣鏄庣‘銆侟/p>
NGS娴嬪簭鎶€鏈?/strong>
浜屼唬DNA娴嬪簭鎶€鏈張绉颁笅涓€浠f祴搴忔妧鏈?Next-generation sequencing锛孨GS)锛屾槸绗竴浠f祴搴忔妧鏈殑鍒掓椂浠e彉闈╃殑鏍稿績銆備簩浠f祴搴忕浉瀵逛簬绗竴浠f祴搴忕殑鏈€澶т紭鍔垮氨鏄珮閫氶噺锛岄€傚悎浜庡ぇ鏍锋湰娴嬪簭鏁版嵁鐨勫簲鐢紝鎵€浠ヤ篃绉颁负楂橀€氶噺娴嬪簭(High-throughput sequencing)銆侟/p>
NGS鎶€鏈彲浠ュ疄鐜板鍩哄洜澶ц妯″钩琛屾祴搴忥紝鍙互浠庢牴鏈笂瑙e喅鍗曞熀鍥犻仐浼犵梾鍥犲紓璐ㄦ€с€佸熀鍥犲銆佽〃鍨嬪鏉傞€犳垚璇婃柇闅剧殑瀹為檯闂銆侼GS瀹為獙娴佺▼鏄竴涓枃搴撳埗澶団啋鎹曡幏鈫掓祴搴忊啋鏁版嵁鍒嗘瀽鐨勮繃绋嬶紝鏄幇琛屾渶涓昏鐨勬祴搴忔妧鏈€侟/p>
NGS鎶€鏈洜鍏堕珮鏁堝拰浣庡粔鐨勫崟纰卞熀娴嬪簭鎴愭湰涓轰复搴婂簲鐢ㄦ彁渚涗簡涓嶅彲浼伴噺鐨勫墠鏅紭鍔匡紝灏ゅ叾瀵逛簬鐩稿浼犵粺鐨 Sanger娴嬪簭娉曞叾姣忔浜х敓鐨勬暟鎹噺鍑犱箮鏄ぉ鏂囨暟瀛楋紝鍔犱箣淇℃伅绉戝鐨勬寔缁彂灞曪紝浣垮緱瀵硅繖鏍风殑澶ф暟鎹繘琛屾湁鏁堢殑澶勭悊宸叉垚涓虹幇瀹炪€傜洰鍓峃GS鎶€鏈凡搴旂敤鍦ㄨ偪鐦ょ浉鍏炽€佺敓娈栭仐浼犮€佹劅鏌撶浉鍏炽€佺瀛︾爺绌剁瓑鏂归潰銆侟/p>
鍗曞垎瀛愭祴搴忔妧鏈湪2011骞村拰2014骞达紝PacBio鍜孫xford Nanopore Technologies锛孫NT鍏徃鍒嗗埆鍙戝竷浜嗘柊鍨嬬殑鍗曞垎瀛愭祴搴忔妧鏈钩鍙帮紝杩欑绐佺牬鎬х殑娴嬪簭鎶€鏈鎴愪负绗笁浠f祴搴忔妧鏈€備笌鍓嶄袱浠f祴搴忔妧鏈浉姣旓紝鍏舵渶澶х殑鐗圭偣灏辨槸鍗曞垎瀛愭祴搴忥紝娴嬪簭杩囩▼鏃犻渶杩涜PCR鎵╁锛屽苟涓旂悊璁轰笂鍙互娴嬪畾鏃犻檺闀垮害鐨勬牳閰稿簭鍒椼€侟/p>
绗笁浠f祴搴忚В鍐充簡浜屼唬娴嬪簭璇婚暱鐭殑鎶€鏈毦棰橈紝鍙互杈惧埌杩炵画鏁板崄涓嘼ase娴嬪簭锛岄€傜敤鑼冨洿骞夸笉浠呭彲浠ュDNA銆丷NA杩涜娴嬪簭锛岃繕鍙互瑙傚療铔嬬櫧璐ㄥ強閬椾紶鐗╄川鐨勮〃瑙傞仐浼?鐢插熀鍖?鎯呭喌銆傜洰鍓嶇涓変唬娴嬪簭鍦ㄥ疄楠岀爺绌堕鍩熷彇寰椾簡绐佺牬鎬ц繘灞曪紝鍏嬫湇浜嗕簩浠f祴搴忕殑鐭闀跨殑缂洪櫡锛屽苟涓旇繘涓€姝ユ彁楂樹簡閫氶噺锛屼絾鏄窛绂诲簲鐢ㄥ埌瀹為檯鐨勪复搴婂伐浣滆繕鏈変竴浜涘洶闅鹃渶瑕佸厠鏈嶃€傝繖涓昏鏄洜涓轰笁浠f祴搴忕殑鍑嗙‘鎬ц繕鏈夊緟鎻愰珮锛屾垚鏈篃鐩稿鏄傝吹銆侟/p>
涓変唬娴嬪簭鎶€鏈姣擖/strong>
缁间笂鎵€杩帮紝鎴戜滑鍙互寰楀嚭缁撹锛屼竴浜屼笁浠f祴搴忔妧鏈湪涓嶆柇鐨勫彂灞曚腑閮藉瓨鍦ㄧ潃鍚勮嚜鐨勪紭鍔垮拰涓嶈冻锛屼笁浠f祴搴忔妧鏈浉浜掕ˉ鍏呮彁楂樹簡娴嬪簭鐨勫彲琛屾€э紝闄嶄綆浜嗘祴搴忕殑鎴愭湰銆侟/p>