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| P1015 | 18,000U | - |
| 鍝佺墝: | 涓滅洓 |
| 浜у湴: | 骞垮窞 |
浜у搧缁勫垎
| P1011 | ||
| Taq DNA鑱氬悎閰迭/span> | 5 U/渭l | 100 渭l |
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| 6脳Loading Buffer | 1 ml | |
| P1012 | ||
| Taq DNA鑱氬悎閰迭/span> | 5 U/渭l | 100 渭l |
| 10脳PCR Buffer(Mg2+Plus) | 1.4 ml | |
| dNTPs(鍚?.5 mM) | 1 ml | |
| 6脳Loading Buffer | 1 ml | |
| P1013 | ||
| Taq DNA鑱氬悎閰迭/span> | 5 U/渭l | 200 渭l |
| 10脳PCR Buffer(Mg2+Plus) | 1.4 ml脳2 | |
| 6脳Loading Buffer | 1 ml | |
| P1014 | ||
| Taq DNA鑱氬悎閰迭/span> | 5 U/渭l | 200 渭l |
| 10脳PCR Buffer(Mg2+Plus) | 1.4 ml脳2 | |
| dNTPs(鍚?.5 mM) | 1 ml | |
| 6脳Loading Buffer | 1 ml | |
| P1015 | ||
| Taq DNA鑱氬悎閰迭/span> | 5 U/渭l | 100 渭l脳36 |
| 10脳PCR Buffer(Mg2+Plus) | 1.4 ml脳36 |
娉細1 Taq DNA鑱氬悎閰跺垎涓?.5 U/渭l涓? U/渭l涓ょ鍖呰锛屽彲鑷敱閫夋嫨锛屽娌＄壒鍒鏄庢彁渚? U/渭l鐨勫寘瑁呫€侟br/> 2 10脳PCR Buffer鍒嗕负Mg2+Plus涓嶮g2+Free涓ょ鍖呰锛屽彲鏂逛究閫夋嫨銆傚娌＄壒鍒鏄庢彁渚?0脳PCR Buffer(Mg2+Plus)銆侻g2+Free鐨 10脳PCR Buffer鎻愪緵25 mM MgCl2銆侟br/>
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浜у搧鐗圭偣
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10脳PCR Buffer
500 mM KCl
100 mM Tris-Cl
15 mM MgCl2
1% Triton-100
閰惰串瀛樻恫
20mM Tris-HCl
1mM DTT
0.1mM EDTA
100mM KCl
50 % Glycerol
1% Triton-100
搴旂敤涓句緥
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| 10脳PCR Buffer | 5 渭l |
| dNTPs(2.5 mM) | 4 渭l |
| Taq(5 U/渭l) | 0.25 渭l |
| 瓒呯函姘滁/span> | 琛ヨ冻鑷?0 渭l |
PCR鍙嶅簲鏉′欢
| 95鈩傸/span> | 3 min |
| 95鈩傸/span> | 30 sec |
| 55~68鈩傸/span> | 30 sec 30 Cycles |
| 72鈩傸/span> | 1 min |
| 72鈩傸/span> | 10 min |
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1 Taq DNA鑱氬悎閰跺叿鏈夎劚姘ф牳鑻烽吀杞Щ閰舵椿鎬э紝鍥犳鍦≒CR浜х墿3'鏈閫氬父浼氬姞涓?涓浣欑殑鑵哄槍鍛ゃ€侟br/> 2 纰卞熀鍑洪敊鐜囨槸鎸囧湪姣忎釜纰卞熀鍚堟垚杩囩▼涓墍鎺哄叆鐨勯敊璇牳鑻烽吀鏁扮洰銆俆aq DNA鑱氬悎閰剁殑纰卞熀閿欒鐜囦负1脳10-5銆侟br/> 3 寤鸿鍦ㄥ啺涓婇厤缃甈CR 鍙嶅簲娑插悗锛屽啀鏀惧叆PCR浠腑杩涜鎵╁銆傝繖鏈夊埄浜庢彁楂樻墿澧炵殑鐗瑰紓鎬э紝鍑忓皯闈炵壒寮傛€ф墿澧烇紝寰楀埌鑹ソ鐨凱CR缁撴灉銆侟br/> 4 妯℃澘DNA鎺ㄨ崘鐢ㄩ噺(50 渭l 鏍囧噯PCR浣撶郴)
| 浜虹被鍩哄洜缁凞NA | 0.1 渭g ---1 渭g |
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| 澶ц偁鏉嗚弻DNA | 10 ng-100 ng |
5 濡傝繘琛孭CR鎵╁鍚庯紝闄ょ洰鐨勬潯甯﹀锛岃繕浼撮殢鍏朵粬鏉傚甫锛屽缓璁€傚綋鍑忓皯浣撶郴涓殑Taq閰剁敤閲忥紝浠ュ鍔燩CR鎵╁鍙嶅簲鐨勭壒寮傛€с€侟br/>
Q&A
闂細涓滅洓Taq DNA鑱氬悎閰朵笌鍥藉鍝佺墝鐨凾aq DNA鑱氬悎閰舵湁浠€涔堝尯鍒紵
绛旓細涓滅洓Taq DNA鑱氬悎閰剁殑娲绘€ф瘮杈冪ǔ瀹氾紝鍏跺搧璐ㄤ笌鍥藉鐭ュ悕鍏徃鐨勪骇鍝佸樊寮備笉澶с€備絾鍥犻叾娲绘€х殑澶嶆潅鎬э紝鎵归棿浜у搧鍙兘浼氭湁宸紓銆傚湪PCR瀹為獙杩囩▼涓紝濡侾CR鎵╁浜х墿鍙樻贰鎴栨棤锛屽彲閫傚綋澧炲姞閰剁殑鐢ㄩ噺锛涘鍙戠幇鏈夎緝寮虹殑闈炵壒寮傛€ф墿澧烇紝閭ｅ彲鍑忓皯閰剁殑鐢ㄩ噺銆侟br/>
闂細涓嶅悓鎵规鐨凾aq DNA鑱氬悎閰剁殑娲绘€ф湁娌℃湁宸紓锛烖br/>绛旓細鏈変竴瀹氱殑宸紓銆備负瑙ｅ喅杩欎竴闂锛屼笢鐩涘凡缁忛€氳繃Taq DNA鑱氬悎閰剁殑瑙勬ā鍖栫敓浜э紝鍑忓皯鐢熶骇鎵规锛屽疄鐜颁骇鍝佸搧璐ㄧ殑鍧囦竴鎬с€侟br/>
闂細濡備綍鍒╃敤Taq DNA鑱氬悎閰惰繘琛屽姞A鍙嶅簲锛烖br/>绛旓細鐢遍珮淇濈湡DNA 鑱氬悎閰?濡侾fu)浜х敓鐨凱CR 鎵╁鐗囨鐨勭函鍖栦骇鐗?-7渭l锛汓br/> 鍔犲叆1渭l Taq DNA 鑱氬悎閰?0脳鍙嶅簲缂撳啿娑?鍚玀gCl2)锛汓br/> 鍔犲叆dATP 鑷崇粓娴撳害0.2 mM锛汓br/> 鍔犲叆5 U鐨凾aq DNA 鑱氬悎閰讹紱
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