分光光度计的原理以及操作流程
2022.06.13 点击2894次
光谱仪又称分光光度计,是一种将具有复杂成分的光分解成光谱线的科学半岛游戏平台官网入口网址 。那么今天来介绍一下分光光度计的原理以及操作流程! 分光光度计的测量范围一般包括波长范围为 380 至 780 nm 的可见光区和波长范围为 200 至 380 nm 的紫外区。 不同的光源有自己独特的发射光谱,因此可以使用不同的发光体作为半岛游戏平台官网入口网址 的光源。 钨灯发射光谱:钨灯光源发射的380-780nm波长的光谱光经棱镜折射后,可得到由红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫组成的连续色谱图; 该色谱图可作为分光光度计的可见光源。 一、分光光度计的原理: 分光光度计使用可以产生多种波长的光源。 通过一系列分光装置,产生具有特定波长的光源。 光线通过被测样品后,部分光线被吸收,计算样品的吸光度值,转化为样品的浓度。 . 样品的吸光度与样品的浓度成正比。 单色光辐射通过被测物质溶液时,被物质吸收的量与物质浓度和液层厚度(光程长度)成正比,关系如下: A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc 式中:A为吸光度; I0为入射单色光强度; I 为透射单色光强度; T——物质的透光率; k 为摩尔吸光系数; L为待分析物质的光路,即比色皿的边长; c 是物质的浓度; 物质对光的选择性吸收波长,以及相应的吸收系数是物质的物理常数。 当纯物质在一定条件下的吸光系数已知时,可将供试品在相同条件下配制成溶液,测定其吸光度,由上式可计算出供试品中该物质的含量 公式。 在可见光区,除了一些吸收光的物质外,很多物质本身不吸收光,但可以通过加入显色剂或在一定条件下显色处理来确定,因此也称为比色分析。 由于显色时影响色深的因素较多,且常使用单色光纯度较差的半岛游戏平台官网入口网址 ,因此测定时应同时使用标准物质或对照物质。 二、分光光度计的操作方法: 1、打开电源,打开半岛游戏平台官网入口网址 开关,打开样品室暗箱盖,预热10分钟。 2.将灵敏度开关调到“1”档(如果零位调节器没有调到“0”档,则应选择更高的档位。) 3. 根据所需波长转动波长选择器旋钮。 4、将空白溶液和测定溶液分别倒入比色皿的3/4处,用镜头纸擦拭外壁,放入样品室,将空白管对准光路。 5、调零位调节器,暗箱盖打开,使读盘指针指向t=0。 6、合上暗箱盖,调节“100”调节器使空白管的t=100,待指针稳定后逐渐拉出样品滑杆,读出测量管的光密度值 并记录下来。 7、比色完成后,关闭电源,取出比色皿清洗,用软布或软纸擦拭样品室。 |
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