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ML-323

品牌
J&K
CAS
1572414-83-5
货号
952639
规格纯度
99%, 一种有效的可逆的 USP1-UAF1 抑制剂
价格
713 *本价格含增值税费
促销
服务
  • 原厂保证
  • 包邮
  • 增值税票
数量
- +
半岛bd体育手机客户端 名称:
1572414-83-5
ML-323
半岛bd体育手机客户端 介绍:

基本信息

分子式 C23H24N6
分子量 384.48
存储条件 Freezer -20℃

半岛bd体育手机客户端 描述

ML323 是强效的选择性的USP1-UAF1抑制剂,其IC50为76 nM。

靶点(IC50 & Targe)

USP1-UAF1,76nM

USP1-UAF1选择性抑制剂。

体外研究

ML323通过抑制H596细胞中USP1–UAF1活性而抑制PCNA 和 FANCD2去泛素化。此外,ML323通过以两个主要的DNA损伤应答途径(TLS 和 FA)为靶点,增强顺铂在H596细胞和U2OS骨肉瘤细胞中的毒性。[1]

激酶实验

高通量筛选:对于HTS,USP1-UAF1活性使用泛素-罗丹明110为底物进行检测,泛素的C端甘氨酸和罗丹明之间的酰胺键水解作用导致荧光增加。该测定被小型化为4微升体积,在1,536孔中以定量的HTS模式筛选大约402,701种化合物,每种测试化合物以4到5种浓度范围测定。试验显示出很强的性能,整个筛选中因子Z的平均值为0.8。

细胞实验

Cell lines: H596 细胞

Concentrations: ~30 μM

Incubation Time: 7-12天

Method:对于细胞集落形成实验,细胞以300–500细胞每孔接种于6孔板,并生长过夜。然后将细胞用单独的ML323,单独的顺铂或顺铂与ML323(1:1或 1:4)的组合以指示浓度处理。细胞用等体积的DMSO和生理盐水处理,作为对照组。处理48小时后,加入新鲜的生长培养基,细胞再培养5-10天以形成集落。对于UV联合治疗,细胞用指示浓度的ML323或等体积的DMSO处理。48小时后,移除培养基,细胞在254nm下以指示剂量被照射。加入新鲜生长培养基,细胞再培养5-10天以形成集落。没有被UV照射过,但被ML323或等体积DMSO处理过的细胞作为对照组,并指定为100%。细胞集落形成后,细胞用甲醇固定,并用0.5%结晶紫着色。大于50个细胞的集落被计数。集落的数量通过三个重复的板测定。剂量反应曲线使用GraphPad Prism产生,使用CalcuSyn计算复合指数进行分析,以测定加入固定比率顺铂和USP1-UAF1抑制剂所影响的细胞分数。

(Only for Reference)

参考文献

[1] Liang Q, et al. Nat Chem Biol. 2014 , 10(4), 298-304.

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