IMP 脱氢� I 型和 II 型酶活�?

IMP脱氢酶I型和II型从表达人类酶的E. coli中纯化得到。试验使用平底，UV透明�?6孔板进行。最�?00 ��L反应混合物包�?.1 M Tris�?.1 M KCl�? mM EDTA pH 8.0�? mM DTT，和40 nM I型或II型IMP 脱氢酶。加�?00 ��M NAD�?00 ��M IMP起始反应，然后在37 ��C下培�?.5小时。NAD转化为NADH的反应速率根据340 nm下吸光度的增加测量。试验在50%人血清存在下进行，以估计不同IMP脱氢酶抑制剂对血清蛋白的结合、�/p>

细胞实验

Cell lines: ConA-刺激� T 细胞� LPS-刺激� B 细胞

Concentrations: 0 � 10 ��M

Incubation Time: 48 小时

Method:�?周大雄性Lewis大鼠的脾脏无菌移除，制备成单细胞悬浮液，得到的脾细胞悬浮在包�?0% 胎牛血清，100 U/mL青霉素，�?00 ��g/mL链霉素的RPMI1640培养基中。试验在平底微量滴定板中进行，每个孔包含150000脾细胞，总体积为100 ��L。脾细胞在包�? ��g/mL 伴刀豆球蛋白A (ConA) 或脂多糖(LPS)( 分别作为T或B细胞分裂�?的培养基中，与不同浓度的MPA�?7 ��C，潮湿的5% CO2-95%空气环境中培�?8小时。在培养的最�?小时，细胞用1 ��Ci 3H-胸苷/孔脉冲处理，并采集到细胞采集器加压的玻璃纤维上。增殖细胞对3H-胸苷的摄取使用液体闪烁计数器测定。同种抗�?特异性T细胞的体外免疫反应使用一种混合淋巴细胞反应试验以增殖响应评估。来�?周大雄性Lewis大鼠的肠系膜淋巴结细胞和来自8周大雄性ACI大鼠的脾细胞分别用作响应器和刺激细胞。制备单细胞悬浮液，响应细胞与辐�?20 Gy)刺激细胞在RPMI1640中，�?0%胎牛血清，100 U/mL青霉素和100 ��g/mL链霉素增补，�?6孔板(U-底部)，且不同浓度MPA (总体积：200 ��L�?7 ��C�?% CO2湿润的大气，72 小时)存在下进行培养。作为阴性对照，应答细胞与辐射的Lewis大鼠脾细胞进行培养。细胞增殖通过3H-胸苷的摄取定量、�/p>

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动物实验

Animal Models: 腹部血管异位心脏移植的Lewis大鼠

Formulation: Mycophenolate mofetil溶解�?.5%甲基纤维素水�?/p>

Dosages: �?0 mg/kg

Administration: oral administration

(Only for Reference)

参考文�?/b>

[1] Nakanishi T, et al. Int Immunopharmacol. 2010, 10(1), 91-97.

[2] Dehghani F, et al. Neuropathol Appl Neurobiol. 2010, 36(7), 598-611.

[3] Ozgen M, et al. Clin Exp Dermatol. 2012, 37(1), 48-54.

[4] Ebrahimi F, et al. J Neuroinflammation. 2012, 9(1), 89.

安全信息

图形或危害标忖�/td>
提示�?/td>	Warning
危险说明	H302 H400
防范说明	P273
UN号码	3077
危险分类	9
包装等级	III
WGK	3